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试管液体接种的操作有MPN法,你知道吗?

阿立指南 生活指南 2022-09-07 16:09:22 240 0

液体培养基接种是利用接种环、移液管或移液管等工具将细菌细胞或菌液转移到试管、三角瓶等容器中的液体培养基中的一种接种方法。操作与前面的斜面接种基本相同,但应注意液体培养基试管口或三角瓶瓶口稍向上,防止培养液流出;擦拭干净并塞上棉塞后,用手掌轻轻敲击试管或轻轻摇晃三角烧瓶,使细胞混合均匀。

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试管液体接种

试管液体接种是将一定体积的样品悬浮液加入到装有指定/指定液体培养基的试管中,或将在标准规定条件下培养的一定体积的培养基加入到试验中。含有指定/指定液体介质的试管。在固定液体培养基的试管中(有时是指从接种环中取一个环,或吸取一定体积,如0.1ml、1ml等)。试管内液体接种操作包括大肠菌/大肠杆菌的MPN检测,沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌的二次富集转移操作。

这里是使用移液器将一定体积的样品悬浮液转移到含有指定/指定液体介质的试管中的示例,

①用酒精棉对工作台面进行消毒。将移液器吸头盒放在酒精灯右侧,靠近酒精灯。将需要转移的试管插入试管架,放在酒精灯左手附近。将移液器调整到适当的刻度,并将其放在靠近右手的架子上。垃圾桶放在右手够不到的地方。

②点亮酒精灯,靠近酒精灯火焰的左手打开移液器吸头盒,右手用力插入吸头两次,防止吸头松动脱落。拉出移液器并将其盖住。分配器吸头盒盖。左手取待转移的试管,试管底部在左手掌心,移液器吸头和试管口应在酒精火焰周围的无菌区灯。

③ 将试管伸到右手边。右手食指、中指和无名指握住移液器,大拇指抵住移液器按钮,小指和手掌下缘夹住试管盖用力拉出。如果操作者手小,可以用食指、无名指和小指握住移液器,大拇指仍然放在液体按钮上。伸出中指,用中指内侧和食指、无名指外侧夹住试管帽。将试管口和移液器吸头靠近火焰,烧试管口一周,只需将吸头插入靠近火焰的试管口,将移液器按钮按到一档(轻轻推不要动)。不要将移液器吸头粘在试管底部,而是倾斜试管,使液位接近试管口,并且不会通过吸头的尖端/末端。慢慢松开右手拇指,让液体慢慢吸入洗发水中,注意不要吸入空气。如果吸入空气,则必须将液体强制返回管中以重新吸收。当右手大拇指完全松开后,收回移液器,注意吸头尽量保持在酒精灯火焰周围,并保持吸头朝下,以防液体回流到移液器中造成污染。

④ 吸完液体后,将移液器从试管中取出液体培养方法,将移液器吸头移到远离操作者的酒精灯火焰一侧,将试管口放在火焰上灼烧消毒。

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⑤灭菌后,用右手小指快速盖住试管盖。此时,移液器吸头仍应处于火焰形成的无菌区域内,且不应距离酒精灯的火焰太远。将盖子盖在试管上以将试管放回原位。

⑥左手取待转入液体的试管,右手将移液器吸头靠近酒精灯的火焰。

⑦保持右手握住移液器,取下试管盖,烧掉试管口。将吸头靠在试管口内壁,慢慢将移液器按钮推到底(完全推到第二档,使残留在吸头/吸头末端的液体也流出) 推出液体时注意不要将吸头深入管底,也不要用力过猛导致液体飞溅。

⑧左手将试管口靠近火焰进行消毒,将移液器吸头移至酒精灯火焰的另一侧。再烧试管口

⑨ 右手握住移液器,盖上试管盖,将试管放回原位。移取液体后,按下移液器滑块,将吸头移至废液箱,然后将移液器放回架子上。关掉酒精灯,消毒清洁台面。

三角瓶液体接种

与试管中的液体接种培养相比液体培养方法,三角瓶中的接种培养的优点是通风效果好。在霉菌或某些细菌的回春培养或摇床培养中较为常见。操作与上述液体试管接种操作基本相同。当液体最后加入三角瓶时,将三角瓶倾斜,移液器吸头抵住三角瓶内壁,缓慢加入液体,避免飞溅和气泡

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